Ultramicrométodo inmunocitoquímico (UMICIQ): su aplicación para cuantificar linfocitos T CD4+ en portadores del VIH y en pacientes con SIDA / Immunocytochemical ultramicro method: Ist application to quantitiate T CD4+ lymphocytes in HIV carriers and in AIDS patients

Se aplicó el ultramicrométodo inmunocitoquímico (UMICIQ) para la cuantificación de linfocitos T CD4+ en portadores del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH-I) y en pacientes con SIDA. Se estudiaron 260 portadores del VIH del Sanatorio de Santiago de la Vegas y del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" y 26 controles normales. De los 260 infectados, 35 eran del grupo II, 33 del grupo III, 61 del IV y 31 se clasificaron como casos de SIDA (IV-C1) (clasificación del CDC, 1986). Las comparaciones entre los grupos se realizaron mediante la prueba de la t de Student. Al comparar las medias de los valores de linfocitos T CD4+ del grupo de SIDA con el resto de los grupos se encontraron diferencias estadísticas tanto en valores relativos (por ciento) como en valores absolutos (cel/uL). Sólo 6 de los 31 casos de SIDA mostraron valores de linfocitos T CD4+ superiores a 200 cel/u. Este método de cuantificación permite de forma económica, sensible y específica, detectar portadores de VIH con valores de linfocitos T CD4+ menores de 200 cel/uL y de esta forma clasificarlos según la definición ampliada al caso SIDA del CDC, 1993 (AU)

Ultramicrométodo inmunocitoquímico. Titulación de anticuerpos utilizados para el inmunofenotipaje celular / m

Se describe el procedimiento para la titulación de los anticuerpos primarios y los antisueros conjugados, que hizo posible la introducción en el Instituto de Hematología Inmunología, de un ultramétodo inmunocitoquímico para el estudio del inmunofenotipo en enfermedades inmunológicas y en las hemopatías malignas. Este método emplea células no deshidratadas adheridas a láminas portaobjetostratadas con poli-lisina. Al determinar la dilución de trabajo de 32 anticuerpos monoclonales y 3 policlonales, se observó que con la misma cantidad de estos reactivos se pueden realizar entre 5 y 100 veces más determinaciones con respecto al método de inmunofluorescencia indirecta. Entre otras ventajas, este método permite realizar 21 determinaciones en una misma lámina portaobjeto, requiere una menor cantidad de células, los resultados se evalúan en un microscopio de luz visible y las colaboraciones no se desvanecen con el tiempo, lo que permite realizar estudios retrospectivos (AU)

Introducción de un ultramicrométodo inmunocitoquímico para la cuantificación de subpoblaciones linfocitarias identificadas con anticuerpos monoclonales / m

Se introdujo en nuestro laboratorio un ulktramicrométodo inmunocitoquímico (UMICIQ) para la cuantificación de las principales subpoblaciones de linfocitos T identificadas con los anticuerpos monoclonales anti-CD3, anti-CD4 y anti-CD8. Las deteminaciones se realizaron en células mononucleares de sangre periférica de donantes de sangre supuestamente sanos, con edades entre 21 y 47 años. El estudio de los 15 primeros individuos se realizó tanto por el UMICIQ como por un micrométodo de inmunofluorescencia indirecta (IFI), y cuando se compararon los resultados, no se encontraron diferencias estadísiticamente significativas. Para establecer los valores de referencia para el UMICIQ se tomaron las muestras de 30 donantes. Con la aplicación de este método se pueden evaluar las subpoblaciones linfocitarias con una sensibilidad y especificidad similares a las observadas con la microtécnica del IFI; sin embargo, se introducen una serie de ventajas como: uso de menores concentraciones de células y por ende menor volumen de sangre para cada determinación, uso de diluciones mayores de los anticuerpos y conjugados, se hace innecesario el uso del microscopio de luz UV y de la centrífuga refrigerada, se pueden distinguir la morfología y el linaje de las células simultáneamente con la reactividad inmunológica de sus antígenos (AU)

Introduccion de un ultramicrometodo inmunocitoquimico para la cuantificacion de subpoblaciones linfocitarias identificadas con anticuerpos monoclonales

Se introdujo en nuestro laboratorio un ulktramicrometodo inmunocitoquimico (UMICIQ) para la cuantificacion de las principales subpoblaciones de linfocitos T identificadas con los anticuerpos monoclonales anti-CD3, anti-CD4 y anti-CD8. Las deteminaciones se realizaron en celulas mononucleares de sangre periferica de donantes de sangre supuestamente sanos, con edades entre 21 y 47 anos. El estudio de los 15 primeros individuos se realizo tanto por el UMICIQ como por un micrometodo de inmunofluorescencia indirecta (IFI), y cuando se compararon los resultados, no se encontraron diferencias estadisiticamente significativas. Para establecer los valores de referencia para el UMICIQ se tomaron las muestras de 30 donantes. Con la aplicacion de este metodo se pueden evaluar las subpoblaciones linfocitarias con una sensibilidad y especificidad similares a las observadas con la microtecnica del IFI; sin embargo, se introducen una serie de ventajas como: uso de menores concentraciones de celulas y por ende menor volumen de sangre para cada determinacion, uso de diluciones mayores de los anticuerpos y conjugados, se hace innecesario el uso del microscopio de luz UV y de la centrifuga refrigerada, se pueden distinguir la morfologia y el linaje de las celulas simultaneamente con la reactividad inmunologica de sus antigenos

Ultramicrometodo inmunocitoquimico. Titulacion de anticuerpos utilizados para el inmunofenotipaje celular

Se describe el procedimiento para la titulacion de los anticuerpos primarios y los antisueros conjugados, que hizo posible la introduccion en el Instituto de Hematologia Inmunologia, de un ultrametodo inmunocitoquimico para el estudio del inmunofenotipo en enfermedades inmunologicas y en las hemopatias malignas. Este metodo emplea celulas no deshidratadas adheridas a laminas portaobjetostratadas con poli-lisina. Al determinar la dilucion de trabajo de 32 anticuerpos monoclonales y 3 policlonales, se observo que con la misma cantidad de estos reactivos se pueden realizar entre 5 y 100 veces mas determinaciones con respecto al metodo de inmunofluorescencia indirecta. Entre otras ventajas, este metodo permite realizar 21 determinaciones en una misma lamina portaobjeto, requiere una menor cantidad de celulas, los resultados se evaluan en un microscopio de luz visible y las colaboraciones no se desvanecen con el tiempo, lo que permite realizar estudios retrospectivos

Obtención de anticuerpos especifícos para la IgG de ratón / Production of specific antibodies to ouse IgG

Se llevó a cabo la purificación de IgG de ratón, con la que se preparó un antisuero en cabra. A partir de este antísuero se aislaron los anticuerpos específicos por cromatrografía de afinidad, con el empleo de la IgG de ratón purificada acoplada a la Sepharosa C1-4B. Se obtuvo una concentración de los ancuerpos aislados de 1,5 mg/mL, con una cantidad que representó aproximadamente el 3 por ciento del total de anticuerpos. Se evaluó la pureza, la reactividad y la especificidad de estos anticuerpos (AU)

Estandarización de un método citoquímico para el estudio de la enzima esto 5'-nucleotidasa en linfocitos / Standarization of a cytocheical method for the study of Ecto-5'nucleotidase enzyme on lymphocytes

Se describe un método para la detección de la enzima ecto 5'nucleotidasa (5'NT) en linfocitos de sangre periférica. El estudio se realizó en 25 adultos sanos (10 mujeres y 15 hombres) con un rango de edad entre 19 y 44 años y una edad promedio de 30 años. La cantidad de células y de reactivos se redujo con respecto a otras técnicas. El rango de células 5'NT+ obtenido es de 18 a 40 por ciento , lo que se corresponde con lo informado por otros autores (AU)

Linfoma linfocitico intermedio rn fase leucemica. Características citomorfológicas e inmunofenotipicas / Interediate lymphocytic lymphoma in leukemic phase. Cytomorphological and immunophenotypic features

Se describen las alteraciones citomorfológicas e inmunofenotípicas de las células leucémicas en un caso de linfoma linfocítico intermedio en fase leucémica. Las células linfoides circulantes eran en su mayoría de mediano tamaño, muy pleomórficas y con irregularidades nucleares. En su membrana expresaban inmunoglubulinas de superficie, HLA-DR, CD19 y CD76, pero no el CD5, ni formaban rosetas de ratón. En general, las células leucémicas presentaban algunas características semejantes a las del manto folicular normal (AU)

Linfoma linfocitico intermedio rn fase leucemica. Características citomorfológicas e inmunofenotipicas / Intermediate lymphocytic lymphoma in leukemic phase. Cytomorphological and immunophenotypic features

Se describen las alteraciones citomorfológicas e inmunofenotípicas de las células leucémicas en un caso de linfoma linfocítico intermedio en fase leucémica. Las células linfoides circulantes eran en su mayoría de mediano tamaño, muy pleomórficas y con irregularidades nucleares. En su membrana expresaban inmunoglubulinas de superficie, HLA-DR, CD19 y CD76, pero no el CD5, ni formaban rosetas de ratón. En general, las células leucémicas presentaban algunas características semejantes a las del manto folicular normal

Estandarización de un método citoquímico para el estudio de la enzima esto 5'-nucleotidasa en linfocitos / Standarization of a cytochemical method for the study of Ecto-5'nucleotidase enzyme on lymphocytes

Se describe un método para la detección de la enzima ecto 5'nucleotidasa (5'NT) en linfocitos de sangre periférica. El estudio se realizó en 25 adultos sanos (10 mujeres y 15 hombres) con un rango de edad entre 19 y 44 años y una edad promedio de 30 años. La cantidad de células y de reactivos se redujo con respecto a otras técnicas. El rango de células 5'NT+ obtenido es de 18 a 40 por ciento , lo que se corresponde con lo informado por otros autores

Obtención de anticuerpos especifícos para la IgG de ratón / Production of specific antibodies to mouse IgG

Se llevó a cabo la purificación de IgG de ratón, con la que se preparó un antisuero en cabra. A partir de este antísuero se aislaron los anticuerpos específicos por cromatrografía de afinidad, con el empleo de la IgG de ratón purificada acoplada a la Sepharosa C1-4B. Se obtuvo una concentración de los ancuerpos aislados de 1,5 mg/mL, con una cantidad que representó aproximadamente el 3 por ciento del total de anticuerpos. Se evaluó la pureza, la reactividad y la especificidad de estos anticuerpos

Factor inhibidor de la migración leucocitaria antes del tratamiento con factor de transferencia y después de el / Leukocyte migration inhibitory factor before and after treatment with transfer factor

Se realizaron determinaciones de la actividad del factor inhibidor de la migración leucocitaria "in vitro" en 10 niños con infecciones respiratorias recurrentes antes del tratamiento con factor de transferencia y después de él. Se encontró un incremento significativo (pó0,01) de esta función celular y de la respuesta cutánea a la tuberculina "in vivo", después del tratamiento con este medicamento. Los resultados señalan la importancia del estudio de pacientes con esta entidad y la utilidad de evaluar estas variables en su seguimiento clínico y terapéutico

Factor inhibidor de la migración leucocitaria antes del tratamiento con factor de transferencia y después de el / Leukocyte migration inhibitory factor before and after treatment with transfer factor

Se realizaron determinaciones de la actividad del factor inhibidor de la migración leucocitaria "in vitro" en 10 niños con infecciones respiratorias recurrentes antes del tratamiento con factor de transferencia y después de él. Se encontró un incremento significativo (pó0,01) de esta función celular y de la respuesta cutánea a la tuberculina "in vivo", después del tratamiento con este medicamento. Los resultados señalan la importancia del estudio de pacientes con esta entidad y la utilidad de evaluar estas variables en su seguimiento clínico y terapéutico

Transformación linfoblásticainducida por el mitogeno extraído de la fitolaca americana. valores de referencia / Lyphoblastic transformation induced by mitogen extracted from American Phytolaca : reference values

Se evaluó la transformación linfoblástica frente al mitógeno extraído de la Fitolaca americana por criterio de timidina tritiada, en células mononucleares de sangre periférica de 50 donantes (25 del sexo masculino y 25 del sexo femenino). No se encontró diferencia estadísticamente significativa cuando se comparó el índice de estimulación entre los sexos. Se determinó como valor de referencia para controles normales el de 36,65+-14,12 de índice de estimulación (AU)

Formación de rosetas de monocitos con hematies sensibilizados / Foration of monocyte rosettes with sensitized red blood cells

Se normalizó un método de formación de rocetas de monocitos con eritrocitos de carnero sensibilizados y antisuero de conejo clase IgG (REA-M), en 30 adultos sanos. Los valores normales obtenidos muestran un promedio de 71,60 por ciento +-8,90 de monocitos formadores de rosetas EA, lo que se corresponde con lo comunicado por diferentes autores. Esta técnica permite cuantificar la subpoblación de monocitos con receptores Fc para IgG y su aplicación en el estudio de diferentes enfermedades como las inmunodeficiencias primarias y secundarias (AU)

Formación de rosetas de monocitos con hematies sensibilizados / Formation of monocyte rosettes with sensitized red blood cells

Se normalizó un método de formación de rocetas de monocitos con eritrocitos de carnero sensibilizados y antisuero de conejo clase IgG (REA-M), en 30 adultos sanos. Los valores normales obtenidos muestran un promedio de 71,60 por ciento +-8,90 de monocitos formadores de rosetas EA, lo que se corresponde con lo comunicado por diferentes autores. Esta técnica permite cuantificar la subpoblación de monocitos con receptores Fc para IgG y su aplicación en el estudio de diferentes enfermedades como las inmunodeficiencias primarias y secundarias

Transformación linfoblásticainducida por el mitogeno extraído de la fitolaca americana: valores de referencia / Lymphoblastic transformation induced by mitogen extracted from American Phytolaca : reference values

Se evaluó la transformación linfoblástica frente al mitógeno extraído de la Fitolaca americana por criterio de timidina tritiada, en células mononucleares de sangre periférica de 50 donantes (25 del sexo masculino y 25 del sexo femenino). No se encontró diferencia estadísticamente significativa cuando se comparó el índice de estimulación entre los sexos. Se determinó como valor de referencia para controles normales el de 36,65+-14,12 de índice de estimulación

Antígenos de superficie y su relación con diferentes estadios de activación de los linfocitos T II antígenos de activación intermedios / Surface antigens and their relationship with different activation stages of T-lymphocytes II intermediate and late antigens

Se describen las características quimiofísicas y biológicas, conocidas hasta ahora, de diferentes antígenos de activación intermedios se encuentran el CD38 y las moléculas reconocidas por los anticuerpos monoclonales OKT23 yOKT24. Entre los antígenos de activación tardíos se encuentran el LDA1,act1, VLA1 y la molécula RLA-DR. Los antigénos más estudiados han sido el CD38 y la molécula HLA_DR. Recientemente, la molécula VLA-1 perteneciente a la familia de la integrinas, también se ha estudiado ampliamente